AAT Bioquest16052 MitoROS™ 580 *Optimized for Detecting Reactive Oxygen Species (ROS) in Mitochondria* 500 Tests 

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美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助quan世界的科學家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest 16052 MitoROS™ 580 *Optimized for Detecting Reactive Oxygen Species (ROS) in Mitochondria* 500 Tests，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：16052

產(chǎn)品名稱：MitoROS™580*優(yōu)化用于檢測線粒體中的活性氧（ROS）*

英文名稱：MitoROS™ 580 *Optimized for Detecting Reactive Oxygen Species (ROS) in Mitochondria*

產(chǎn)品規(guī)格：500 Tests

 AAT Bioquest優(yōu)化用于檢測線粒體中的活性氧

產(chǎn)品說明：

活性氧（ROS）是含有氧的化學反應分子。實例包括超氧化物、羥基自由基、單線態(tài)氧和過氧化物。由于存在不成對的價殼電子，ROS具有高度反應性。ROS是氧氣正常代謝的天然副產(chǎn)物，在細胞信號傳導和體內(nèi)平衡中具有重要作用。然而，在環(huán)境壓力（例如紫外線或熱暴露）期間，ROS水平會急劇增加。這可能會對細胞結(jié)構(gòu)造成嚴重損害。累積起來，這被稱為氧化應激。MitoROS™ 580是一種超氧化物敏感染料，在加載到活細胞中時定位于線粒體中。MitoROS™ 580被超氧化物氧化產(chǎn)生紅色熒光。MitoROS™ 580 可用于使用熒光顯微鏡或熒光流式細胞儀監(jiān)測線粒體中的超氧化物。MitoROS™ 580試劑滲透到活細胞中，選擇性地靶向線粒體。它被超氧化物迅速氧化。它不太可能被其他活性氧（ROS）和活性氮（RNS）氧化。氧化產(chǎn)物在細胞中具有高熒光。MitoROS™ 580為研究各種病理中的氧化應激提供了有價值的工具。

示例協(xié)議

一目了然

重要說明

此協(xié)議僅提供指南，應根據(jù)您的特定需求進行修改。在制作MitoROS™ 580工作溶液之前根據(jù)需要處理細胞。

儲備液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環(huán)。

1. MitoROS 580 儲備溶液 （1000X）將 13 μL DMSO 加入 MitoROS™™ 580 小瓶中并充分混合。

注意：未使用的儲備溶液可以儲存在-20oC.避光。

工作溶液的制備

MitoROS™ 580工作溶液（2X）：

將DMSO儲備溶液稀釋到具有20 mM Hepes緩沖液（HHBS）的Hanks溶液中，制成2X工作溶液。注意：2X MitoROS™ 580工作溶液不穩(wěn)定，請及時使用。

實驗方案樣本

1. 根據(jù)需要處理細胞。

2. 將細胞（例如100μL/孔在96孔板中）與等體積的2X MitoROS™ 580工作溶液在10°C下孵育30-37分鐘，避光。注意：MitoROS™ 580的最終細胞濃度不應超過1 X.濃度超過1 X會產(chǎn)生細胞毒性作用，包括線粒體形態(tài)改變以及熒光重新分布到細胞核和細胞質(zhì)。注意：不同的細胞對MitoROS™ 580的反應不同，相應地調(diào)整工作濃度。

3. 輕輕洗滌細胞三次，然后用HHBS緩沖液代替。

4. 使用適當?shù)臒晒鈨x器（例如熒光顯微鏡，流式細胞儀）分析細胞，Ex / Em = 510 / 580 nm。

  AAT Bioquest優(yōu)化用于檢測線粒體中的活性氧

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